Elektroforéza nukleových kyselin pomocí GeneRuler 50 bp DNA Ladder

Připravili jsme pro vás pracovní protokol pro použití GeneRuler 50 bp DNA Ladder. Jedná se o postup pro dimenzování a přibližnou kvantifikaci širokého spektra dvouřetězcové DNA v agarózovém nebo polyakrylamidovém gelu. Žebříček se skládá ze třinácti individuálně chromatograficky čištěných fragmentů (v párech bází) 1000, 900, 800, 700, 600, 500, 400, 300, 250, 200, 150, 100, 50. Pro jednoduchou orientaci obsahuje dva referenční proužky (500 a 250 bp). Žebříček je rozpuštěn v TE pufru.

Specifikace GeneRuler 50 bp DNA Ladder

Skladovací pufr
10 mM Tris-HCl (pH 7.6), 1 mM EDTA

6X DNA Loading Dye
10 mM Tris-HCl (pH 7.6), 0.03% bromophenol blue
0.03% xylene cyanol FF, 60% glycerol and 60 mM EDTA


Certifikáty analýz

  • Dobře definované proužky jsou formovány během elektroforézy na agarózovém gelu.
  • DNA koncentrace se určuje spektofometricky.
  • Nepřítomnost nukleázy je potvrzená přímým nukleázovým testem.

Protokol na použití GeneRuler 50 bp DNA Ladder

Složky Gely
Agarózový Polyakrylamidový
DNA Ladder (0,5-1µg) 1-2µL 1-2µL
6x DNA Loading Dye 1µL 0.5µL
Deionizovaná voda 4-3µL 1.5-0.5µL
Celkové množství 6µL 3µL

KROK 1: Promíchejte jemně všechny složky

KROK 2: Naneste na gel

Protože je kvalita proužků závislá na velikosti a tvaru studniček, je vhodné tomu přizpůsobit nanášku.

Doporučení, jak postupovat při dimenzování a kvantifikaci DNA

  • Před nanesením nevařte.
  • Nařeďte vzorek DNA 6X DNA Loading Dye (#R0611, supplied with the ladder): smíchejte 1 objem barvícího roztoku dye roztoku s 5 objem DNA vzorku.
  • Nanášejte stejné objemy DNA vzorku i  DNA žebříčku.
  • Pro kvantifikaci - přizpůsobte koncentraci vzorku aby odpovídal koncentraci nejbližšího proužku.
  • Nepřidávejte barvičku do vzorku, ale obarvěte gel po elfu, nebo přidejte barvičku do gelu, jinak můžete ovlivnit odlišný průběh migrace.

Máte otázky k použití GeneRuler 50 bp DNA Ladder? Napište nám!

Položky označené hvězdičkou (*) jsou povinné.



Zasílání novinek e-mailem

Zadejte Váš e-mail a nechte si zasílat novinky a zajímavé informace do vaší e-mailové schránky.

Zasílání novinek e-mailem

Rychlý kontakt

BIOGEN PRAHA s.r.o.
Ke sv. Izidoru 2293/4A
140 00 PRAHA 4

Tel.: +420 241 401 693
E-mail:

>> Kontakty společnosti
>> Kontakty na biobary

© 2017, BIOGEN PRAHA s.r.o. – všechna práva vyhrazena

Prohlášení o přístupnosti | Podmínky užití | Ochrana osobních údajů | Mapa stránek

Webové stránky vytvořila eBRÁNA s.r.o. | Vytvořeno na CMS WebArchitect | SEO a internetový marketing

Nahoru ↑