Terminal Transferase
Přesahující, ustupující nebo tupé konce dvou nebo jednořetězcové DNA slouží jako templát pro Terminal Transferase (TdT). Thermo Scientific TdT se izoluje z kmene E. Coli, který obsahuje klonovaný gen pro terminální transferázu z telecího brzlíku.
Výhody
- Klonována a vyráběna v E. Coli
- Vynikající stabilita a čistota ve srovnání s nativní TdT
- Ekonomické
Aplikace
- Přidání homopolymerních konců k plasmidové DNA a cDNA
- 3' -koncové značení dvou- nebo jednořetězcové DNA s radioaktivně značenými nebo neradioaktivně značenými nukleotidy
- Přidávání jednotlivých nukleotidů na 3 ' konec DNA při in vitro mutagenezi
- Výroba syntetických homo - a heteropolymerů
- RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends)
- In situ lokalizace apoptózy
- Řešení komprese gelu a artefaktů pruhů při sekvenování DNA
Složení
TdT se dodává s optimalizovaným 10X pufrem (bez CoCl2) a zvlášť je 25 mM CoCl2. Chcete-li získat 1ml 1X testovacího pufru, smíchejte 100ul 10X pufru a 60ul 25mM CoCl2 s 840ul H2O. 1X TdT pufr obsahuje: 20 mM Tris -acetát pH 7,9 při 25 °C, 50mM octan draselný, doplněno se 1,5 mM CoCl2 .